Vsebina
Fluorescenca in situ hibridizacija (FISH) je ena od številnih tehnik, ki se uporabljajo za iskanje DNK vaših celic in iskanje prisotnosti ali odsotnosti določenih genov ali delov genov.Veliko različnih vrst raka je povezanih z znanimi genetskimi nepravilnostmi. In genetsko ne govorimo le o dednosti. Celice lahko v življenju delajo napake, ko se delijo in rastejo. V teh celicah se lahko kopičijo mutacije v DNK, povezane z rakom.
Kako deluje
FISH je tehnika, ki s fluorescentnimi sondami zazna specifične gene ali dele genov (zaporedja DNA). Laboratorijsko osebje medicinskega centra in onkologi uporabljajo FISH za pomoč pri ocenjevanju bolnikov, ki imajo raka, in včasih za spremljanje bolnika, ki je že diagnosticiran in zdravljen.
FISH se lahko opravi z različnimi vrstami vzorcev glede na lokacijo in vrsto raka, za katerega obstaja sum: tumorske celice, pridobljene iz periferne krvi, biopsije kostnega mozga ali biopsije bezgavk, in s formalinom pritrjeno tkivo, vgrajeno s parafinom (to se nanaša na vzorec tkiva, ki se v laboratoriju obdela in vstavi v vrsto voska, zaradi česar je bolj tog, tako da ga lahko narežemo na tanke odseke in namestimo za ogled pod mikroskopom).
Kaj pomenijo črke
"H" v FISH se nanaša na hibridizacijo. Pri molekularni hibridizaciji se označena sekvenca DNA ali RNA uporablja kot sonda, ki vizualizira rdečo lego kocko, če želite. Sonda se uporablja za iskanje nasprotne Lego kocke ali zaporedja DNA v biološkem vzorcu.
DNA v vašem vzorcu je kot kupi lego kock in večina kock na teh kupih se ne bo ujemala z našo rdečo sondo. In vse vaše opeke so lepo urejene v 23 parov opečnih kupčkov - vsak kup je eden od vaših parnih homolognih kromosomov, bolj ali manj. Za razliko od lego kock je naša rdeča lego sonda kot močan magnet in najde svoje ujemanje, ne da bi bilo treba razvrščati kupčke.
"F" se nanaša na fluorescenco. Naša rdeča sonda se lahko izgubi v kupih opeke, zato je označena z barvnim fluorescentnim barvilom, da bo zažarela. Ko se med 23 seznanjenimi piloti ujema, fluorescenčna oznaka razkrije njegovo lokacijo. Zdaj lahko vidite, kako lahko raziskovalci in zdravniki s pomočjo FISH pomagajo prepoznati, kje (kateri kup ali kateri kromosom) je določen gen za določenega posameznika.
Stojita "I" in "S" in situ. To se nanaša na dejstvo, da naša rdeča kocka Lego išče svojo tekmo znotraj vzorca, ki ste ga dali.
RIBE in specifični krvni raki
RIBE in drugo in situ postopki hibridizacije se uporabljajo za diagnosticiranje različnih kromosomskih nepravilnosti - sprememb v genskem materialu, sprememb v kromosomih, vključno z naslednjim:
- Delecija: del kromosoma ni več
- Translokacija: del enega kromosoma se odlomi in zalepi na drugi kromosom
- Inverzija: del kromosoma se odlomi in ponovno vstavi, vendar v obratnem vrstnem redu
- Podvajanje: del kromosoma je prisoten v preveč kopijah znotraj celice
Vsaka vrsta raka ima lahko svoj nabor kromosomskih sprememb in ustrezne sonde. FISH ne samo pomaga prepoznati začetne genske spremembe v bolezenskem procesu, kot je rak, temveč se lahko uporablja tudi za spremljanje odziva na terapijo in remisijo bolezni.
Genetske spremembe, ki jih odkrije FISH, včasih ponujajo dodatne informacije o tem, kako se bo verjetno obnašal posameznikov rak, na podlagi tega, kar so v preteklosti opažali pri ljudeh z enako vrsto raka in podobnimi genetskimi spremembami. Včasih se FISH uporablja po postavljeni diagnozi, da pridobi dodatne informacije, ki bi lahko pomagale napovedati izid ali najboljše zdravljenje bolnika.
FISH lahko prepozna kromosomske nepravilnosti pri levkemijah, tudi pri kronični limfocitni levkemiji (CLL). Pri kronični limfocitni levkemiji / majhnem limfocitnem limfomu FISH pacientom omogoča, da ugotovijo svojo prognostično kategorijo: dobra, vmesna ali slaba. Pri akutni limfoblastni levkemiji (ALL) vam genetika levkemičnih celic lahko pove o stopnji tveganja za raka in pomaga pri vodenju terapevtskih odločitev.
Plošče FISH so na voljo tudi za limfome, multipli mielom, proliferativne motnje plazemskih celic in mielodisplastični sindrom. V primeru limfoma plaščnih celic na primer obstaja premestitev da lahko FISH zazna GH / CCND1 t (11; 14), ki je pogosto povezan s tem limfomom.
Zakaj RIBE?
Prednost FISH je, da je ni treba izvajati na celicah, ki se aktivno delijo. Citogenetsko testiranje običajno traja približno tri tedne, ker morajo rakave celice v laboratorijskih jedeh rasti približno 2 tedna, preden jih je mogoče testirati. Nasprotno pa so rezultati FISH običajno na voljo v laboratoriju v nekaj dneh.